Ląstelė egzotiška Rusijoje

Ląstelė egzotiška Rusijoje

Maria Lagarkova
"Science firsthand" №4 (75), 2017

Neuroniniai ląstelės, išskirti iPSC ir paženklinti dažais (žalia – neuronai, raudona – gliulinės ląstelės). Fluorescencinė mikroskopija. Autoriaus nuotrauka

Kai 2006 m. Japonijos mokslininkai sugebėjo pakeisti ląstelių vystymosi programą ir sugrąžinti subrendusius suaugusio organizmo ląsteles į "vaikystę", tai buvo vienas svarbiausių biologijos mokslo laimėjimų pastaraisiais dešimtmečiais. 2012 m. Nobelio premija gavo ląstelių genetinės perprogramavimo technologijos S. Yamanaka autorius ir prasidėjo nauja epocha biologijos pasaulyje. IPSC gamybos technologija (sukeltos pluripotencinės kamieninės ląstelės) leido sukurti ligų modelius iš esmės nauju lygmeniu, kad būtų galima stebėti narkotikus. Greita perspektyva yra naujų terapijos priemonių kūrimas: po korekcijos iPSC patologijos genominės modifikacijos metodais "ištaisytos" ląstelės bus persodintos į ligonį. Kokios yra šio darbo sėkmės tikimybės? Koks Rusijos mokslininkų vaidmuo įgyvendinant šį plataus užmojo projektą?

Apie autorių

Maria Andreevna Lagarkova – narys korespondentas Rusijos mokslų akademijos, biologinių mokslų daktaras, Maskvos valstybinio universiteto profesorius. M. V. Ломоносова (Maskva), Fizikinės-cheminės medicinos federalinio mokslinio ir klinikinio centro laboratorijos biologijos laboratorija (Maskva). 75 mokslinių straipsnių ir 6 patentų autorius ir bendraautorius.

Deja, yra keletas laboratorijų, kurios specializuojasi dirbant su kamieninėmis ląstelėmis arba iPSCs Rusijoje: dvi instituto Novosibirsko akademgotoko ir keletas laboratorijų Maskvoje ir Sankt Peterburge. Per metus reikalingų specialistų skaičius auga, tačiau nepakanka konkuruoti su tarptautinėmis grupėmis. Jei fizikoje Rusija kažkaip "turi prekės ženklą", mūsų ląstelių biologų darbas su užsienio kolegomis nėra ypač įdomus ir suvokiamas kaip egzotiškas. Rusijos patirtis tarptautiniuose ląstelių biologijos projektuose yra atskiras konkrečių mokslininkų darbas. Be to, Rusija sugeba ignoruoti pasaulio patirtį. Taigi, Rusijos federaliniam įstatymui "Dėl biomedicininių korinių gaminių" yra daug klausimų. Pavyzdžiui, tai neleidžia naudoti vaisiaus ir embrioninių kamieninių ląstelių kaip korinių produktų kūrimo šaltinį. Jungtinėse Amerikos Valstijose, Jungtinėje Karalystėje ar Japonijoje tokių draudimų nėra.

IPSC kolonijos, dažytos antikūniais prieš transkripcijos faktorius c-Myc ir Nanog. Fluorescencinė mikroskopija. Nuotrauka A. Bogomazova

JAV ir Japonija, lyderiai ląstelių biologijos srityje, turintys finansinių galimybių ir galintys pritraukti intelektualų elitą iš viso pasaulio, jau pradėjo klinikinius pirmuosius iPSC ląstelių produktus. Intensyvus darbas pluripotentinių kamieninių ląstelių srityje atliekamas Didžiojoje Britanijoje, Švedijoje, Olandijoje ir daugelyje kitų šalių. Žinoma, lyginant su Europa, Jungtinėmis Amerikos Valstijomis ir Japonija, mes neprieštaraus, tačiau kai kurie mūsų mokslininkų atlikti tyrimai yra gana "vienodi". Svarbiausia – stengtis, suprasti, kas vyksta mokslo pasaulyje, tinkamai atstovauti save tarptautiniuose projektuose, o ne apsvarstyti tai, kad pasaulinis mokslas nuėjo į priekį, ir ieškoti tų nišų, kuriose galite dirbti produktyviai: įdomūs reiškiniai, anksčiau nežinomi mechanizmai. Mūsų laboratorija bando rasti panašių nišų, o viena iš jų yra neurologinių ligų vystymosi molekulinių mechanizmų tyrimas, būtent – Ataksi, neurodegeneracinės ligos, turinčios įtakos nugarkauliams ir smegenuliams, dėl kurių sutrinka judesių koordinavimas.

Grįžti langelius į "vaikystę"

Ląstelės, sudarančios daugybę ląstelinių organizmų audinius, daug kartų skiriasi nuo kiaušinio apvaisinimo iki žmogaus mirties. Organizmo vystymosi procese ląstelės "diferencijuoja" (tampa specializuotos), prarandamos transformacijos galimybės į kitus specializuotus tipus. Paprastai tai yra vienkryptis procesas, nustatytas genetinėje programoje: diferencijuota ląstelė vėl negali tapti kumpiu.

Eigenetinio vieningos plėtros proceso reguliavimo idėja buvo suformuluota dar 1940-aisiais. K. Waddingtonas, kuris taip pat pasiūlė sąvoką "epigenetinė" – genų veiklos, kuri neturi įtakos DNR struktūrai, pokytis. Pastarųjų dešimtmečių biologijos pažanga liudija apie gebėjimą efektyviai valdyti ląstelės būklę, keisti jos funkcijas ir specializaciją.

Pirmą kartą ląstelės buvo grąžintos į "vaikystę", vėl sugriebtos, nukreiptos į teisingą kryptį padedant veiksnių komplekse, 2006 m. Pavyko paversti japonų mokslininkams K. Takahashi ir S. Yamanakai, kurie gavo pliuripotencines ląsteles iš pelių fibroblastų. Žinoma, šie darbai buvo pagrįsti ankstesniais R. Brigso, T. Kingo, J. tyrimais.Gerdon ir kiti mokslininkai įrodė, kad suaugusiųjų ląstelių branduolio perkėlimo į enucleated kiaušialąstėje gali sukelti genetinės programos pakeitimo ir naujos organizmo augimo pradžioje.

Darbas su deriniais 24 transkripcijos faktorių, dalyvaujančių įsigijimo ir išlaikymo pliuripotencinių valstybės, Takahashi ir Yamanaka nustatomas seką baltymo veiksnių Oct4, Sox2, Klf4 ir C-Myc (dabar žinoma kaip "kokteilių Yamanaka"), kurio išraiška somatinių ląstelių veda prie jo transformacijos pliuripotentoje. Šis procesas vadinamas "genetiniu perprogramavimu", o rado ląstelės vadinamos "indukuotomis pluripotencinėmis kamieninėmis ląstelėmis" (iPSc). perprogramavimas technika buvo universali ir leidžia gauti pliuripotencinių ląsteles iš skirtingų tipų ląstelių, ne tik pele ir žmogaus, tačiau taip pat kitų gyvūnų, įskaitant žiurkėmis, šunimis ir kiaulių.

Ieškant ataksijos molekulinių mechanizmų

Pagrindinė problema, su gydymu, ir neurodegeneracinių ligų tyrimo yra tai, kad, kai pirmieji simptomai, iš gyvų ląstelių skaičius neturi įtakos ligos sumažinamas taip, kad daugeliu atvejų, padėti žmogui turėti nieko neįmanomo, yra tik remti paliatyvios priežiūros.Dėl tos pačios priežasties šios ligos nėra lengva ištirti: netiesiogiai pacientų tyrimams (tomografijai, biologinių skysčių analizei) nepakanka, o po mirties paimti mėginiai jau mirė – praktiškai nieko nereikia mokytis. Todėl, norint suprasti, kas vyksta su tam tikra patologija molekuliniame lygmenyje, mums reikia gyvūnų ir ląstelių modelių.

Prieš septynerius metus daktaro disertacijos buvo skirtos iPSC, ląstelių apibūdinimui gauti. Prieš trejus metus šios temos persikėlė į magistro darbo lygį, o šiandien – į bakalauro darbo lygį.

Kuriant ataksiją, daugybė kartų CAG tripleto genetoje, kuris koduoja glutamino aminorūgščių, yra genetiškai "kaltas", dėl kurio glutamino liekanos per daug įtraukiamos į kai kuriuos baltymus.

Šiuo metu yra 8 tokių sutrikimų tipų. 1 tipo spinocerebellarinė ataksija yra reta liga, daugiausiai ji buvo tiriama keleto pacientų pavyzdžiu, o iš dalies – gyvūnų modeliais, tačiau neprasiskverbė į subtilius molekulinius mechanizmus. Mes sukūrėme šios ligos ląstelių modelius: imame iš paciento odos biopsiją, perprogramuodami ląsteles iPScs ir išskirkite jas į Purkinje neuronai cerebellum, kurie yra suskaidomi šios ligos metu.

Technologiškai tinkamo "Purkinje" neuronų diferenciacijos protokolo kūrimas yra mūsų pirmoji užduotis, kurią turime išspręsti. Svarbu, kad protokolas būtų atkuriamas ir "dirba" bet kuriai ląstelių linijai. Kitas uždavinys yra ieškoti 1 tipo ataksijos molekulinių mechanizmų naudojant iPScs.

IPSC technologijos praktinis pritaikymas: filtravimo cheminės medžiagos, skirtos vaistų atradimui ir korekcinėms mutacijoms, po kurių transplantuojami "išgydyti" žmogaus ląstelės. Autorius: (Nekrasov ir kt., 2014 m.)

Tokiais tyrimais būtina palyginti sergančias ląsteles su sveikomis. Problema ta, kad žmonės nėra tam tikrų linijų pelės, o jų individualūs skirtumai gali žymiai iškraipyti vaizdą. Todėl negalima palyginti sergančio ir sveiko žmogaus ląstelių – reikia naudoti ląsteles, gautas iš to paties asmens. Norėdami tai padaryti, turite arba "išgydyti" ligotas ląsteles arba įvesti genetinę mutaciją į sveikų ląstelių genomą.

1 tipo ataksijos atveju antroji parinktis yra tinkamesnė: išmokome naudoti CRISPR / Cas metodą, kad CAG pakartotų į sveikos ląstelės genomą.Ši technologija jau tapo įprasta, palyginus ligotas ir sveikas ląsteles, tiriame "RNR molekulių ir baltymų" elgseną, ieškome mechanizmų ligos vystymuisi. Darbai vyksta gana sėkmingai.

Daugumai neurodegeneracinių ligų veiksmingos terapijos dar nėra išvystytos. Tai yra dėl to, kad mokslininkai yra ribotos prieigai prie žmogaus nervų ląstelių ir tinkamų modelių sistemų, skirtų ligų patogenezei ir vaistų testavimui, tyrimo stoka.

Neuronai skiriasi nuo iPSC. Antikūnų beta-III tubulino dažymas. Fluorescencinė mikroskopija. Autoriaus nuotrauka

Labai skubus uždavinys yra ieškoti ir kurti naujus tokių žmogaus neišmatuojamų neurodegeneracinių ligų modelius, tokius kaip Huntingtono liga. Naujai sukurta genetinė perprogramavimo technologija leidžia lengvai prieinamoms ląstelėms (pvz., Odos fibroblastams) gauti iPSC in vitro, kurie savo ruožtu gali be galo augti kultūroje ir diferencijuoti į bet kokius elementų tipus, įskaitant neuronus, kurie yra būtini tyrinėjant neurodegeneracinių molekulių mechanizmus patologija.

Šiandien ląstelių linijų rinkinys, sukurtas Federalinės medicinos biologijos agentūros Federalinės mokslinės ir klinikinės medicinos centro (Maskva) laboratorijos biologijos laboratorijoje, yra unikali Huntingtono ligos tyrimo platforma. Jis gali būti naudojamas kuriant labai veiksmingą sistemą, kurios tikslas – analizuoti ligos molekulinius mechanizmus ir rasti naujų neuroprotektorių, naudojant didelio našumo atrankos metodus.

Ipcc už akių ir farmakologų

Kitas darbo sritis mūsų laboratorijoje yra susijęs su darbais, kurių rezultatai bus praktinio pobūdžio medicinoje, nors iki šiol tai nereiškia, kad rytoj mes gydysim ką nors. Tai yra apie iPS ląsteles pigmento epitelis tinklainė. Čia mes einame per sumuštą kelią: tokių ląstelių klinikiniai tyrimai jau prasidėjo Japonijoje.

Tinklainės pigmento epitelis, gaunamas diferencijuojant žmogaus pluripotencines kamienines ląsteles, yra šešiakampio ląstelė, kuri sudaro tankus ląstelių ir ląstelių kontaktus. Fazinio kontrasto mikroskopija. Mastelio baras – 100 mikronų. Autorius: (Maksimov, 2012)

Pigmentinis epitelis yra labai svarbi ląstelė, todėl jų mirtis daugiausia lemia tinklainės distrofiją. Jie apsaugo nuo ultravioletinės spinduliuotės, fagocytize (užfiksuodami), fotoreceptorių išorinės membranos diskai, atlieka barjerinę funkciją tarp tinklainės ir kraujagyslių ląstelių, palaiko vandens apykaitą. Kaip jau buvo parodyta, pigmentinių epitelio ląstelių transplantacija į laboratorinius gyvūnus (įskaitant beždžionius) žymiai pagerina modeliuojamos ligos eigą – tinklainės distrofiją.

Mes sukūrėme procedūrą iš tinklinės pigmento epitheliui gauti iš iPSC, bet norint toliau judėti būtina bendradarbiauti tarp molekulinių ir ląstelių biologų, fiziologų, histologų ir gydytojų. Tokia sąjunga yra retenybė.

Dabar mes derasi su Citologijos ir genetikos institutu SIBIRO skyriuje Rusijos mokslų akademijos (Novosibirskas), kur yra įdomus modelis greitai senstančių žiurkių OXYS, kuris, be kitų simptomų, anksti retinopatijat.y. tinklainės patologija. Galbūt šis modelis tinka mūsų tyrimams. Tikimės, kad galime rasti ne tik žmones, kurie dirbs žiurkėms, bet ir retai,Specialistai, kurie mūsų laikais yra "nykstantys" – histologai ir fiziologai, ir mes pradėsime bendrą projektą, kuris turi gerą progą pasiekti klinikinius tyrimus.

Rusijos biologai neturi tradicijos kurti mokslinį bendradarbiavimą. Jungtinėse Amerikos Valstijose netgi konkuruojančios grupės dažnai susitinka, nesvarbu, ar nesutariama, ir suprasdami, kad toks bendras darbas atneš mokslinius tyrimus į naują lygmenį. Siekdami šio tikslo mokslininkai dalijasi ląstelių kultūromis, ligų laboratoriniais modeliais, įranga. Labai pasisekė mūsų bendradarbiavimo laboratorija. Daugelį metų mes dirbome kartu su Moksliniu centru neurologijos (narys-narys Rusijos mokslų akademijos S. N. Иллариошкиным ir jo kolegomis) su instituto Citologijos Rusijos mokslų akademijos (profesorius E. V. Казначеева ir jos darbuotojais) su keliomis kitomis Rusijos institutomis ir universitetais. Ir, žinoma, negalima pamiršti prof. S. L. Kiselevo iš Bendrosios genetikos instituto Rusijos mokslų akademijos, dėl kurio prasidėjo ir buvo atliktas pirmasis šalies darbas su žmogaus iPS ląstelėmis.

Organoid, o ne organas

"Cellular" ir "molekulinė biologija" yra labai linkę į "mados tendencijas". Prieš trejus metus "autofagija" buvo išskirtinai madingas žodis, ir daugelis ląstelių procesų buvo susiję su šia sąvoka. Anksčiau šis žodis buvo "apoptozė".Dabar mums madinga dirbti su CRISPR / Cas genomo redagavimo metodu ir kalbėti apie exosomes – mažos membranos pūslelės, kuriomis ląstelės "bendrauja" viena su kita.

Vienas iš tokių "madingų" sričių, kurį taip pat užsiima mūsų laboratorija, yra vadinamojo "kūrimo" kūrimas organelės, pliuripotentinių ląstelių grupės savireguliacijos produktai. Jei diferencijavimo pradžioje galima leisti ląsteles į teisingą kryptį, tarp jų prasideda sąveikos procesai, kuriuose sąlygiškai nustatoma "kur yra galva ir kur yra uodega" ir pradedama atgaminti embrionų vystymosi programą. Auga organoidas, ląstelių masė, kuri pagal savo molekulines ir histologines savybes yra panaši į vieną ar kitą organą.

Vadinamoji smegenų "organoidė", gauta iš indukuotų pluripotentinių kamieninių ląstelių (iPScs). Fazinis kontrastas

Pavyzdžiui, olandų mokslininkai iš vienos kamieninės ląstelės išaugo žarnyno organoidai, kuriuose buvo keletas tipų epitelio ląstelių (endokrininių, sekretorinių, pagalbinių ląstelių tipų) ir su jos pagalba buvo tiriama, kaip bakterijos sąveikauja su žarnyno audiniais. Helicobacter pylorikuris laikomas tam tikrų virškinamojo trakto ligų priežastimi (Dutta & Clevers, 2017). Šį procesą sunku stebėti. in vivo net modelio gyvūno, tačiau tai yra lengva padaryti, kai dirba su organoids.

Mūsų laboratorijoje jau auga akies organų organizmas, taip pat smegenys ir smegenėlė, su kuria mes planuojame studijuoti ataksiją.

Organoidai, ląstelių savaiminio organizavimo produktai, gali atlikti bent dalį organo fiziologinės funkcijos. Jie susideda iš kelių tipų ląstelių ir turi atgaminti procesus organogenezės metu gyvuoju organizmu laboratorijoje. Organinius junginius galima surinkti ne tik iš pluripotencinių ląstelių, bet ir iš suaugusiųjų kamieninių ląstelių ir net iš diferencijuotų ląstelių. Nuotraukoje – akies organoidai, diferencijuoti nuo iPSC. Fazinis kontrastas Autoriaus nuotrauka

Bandymo vamzdelių organai

Grupė Novosibirsko mokslininkų iš citologijos ir genetikos instituto ir instituto chemijos biologijos ir fundamentinės medicinos SIBIRO skyrius Rusijos mokslų akademijos (Novosibirskas), Novosibirskas tyrimų institutas kraujotakos патологии. Akademikas E. N. Meshalkina vysto audinių inžinerijos metodus kraujagyslių regeneracinei medicinai.

Kraujagyslių struktūros, atsirandančios dėl nukreiptų pluripotentinių kamieninių ląstelių kryptinės širdies ir kraujagyslių diferenciacijos. Fluorescencinė mikroskopija. Autorius: (Шевченко, Захарова, 2014 m.)

Šios temos aktualumas yra susijęs su tuo, kad šiuo metu su kraujagyslių patologija sergančių pacientų skaičius sparčiai auga, o tokių ligų gydymas dažnai susijęs su autologinių (donorų) arba sintetinių kraujagyslių pakeitimu. Abi šios galimybės yra ribotos, alternatyva yra kraujagyslių audinių inžinerinių protezų naudojimas.

Novosibirske buvo sukurtas protokolas, skirtas gauti specifines kraujagyslių ląsteles, kurios gali formuoti kraujo indus iš biopsijos medžiagos, taip pat iš žmogaus pliuripotentinių kamieninių ląstelių, kurios nukreiptos į diferenciaciją kryptimi. Gauti kraujagyslių ląstelės yra išsamiai ištirtos, naudojant įvairius funkcinius ir molekulinius genetinius tyrimus, tada jie yra apgyvendinti sintetiniais paviršiais. Gautas kraujagyslių protezavimas yra panašus į savybes natūraliam kraujagysliui (Shevchenko, Zakharova, 2014).

Retas homozigotas – galimybė gydyti iPSC

Dabar yra technologijų ir žinių, kurios leidžia naudoti iPSC tyrinėti ligų patogeniškumą ir stebėti narkotikus. Nors dar nėra žinoma, kada pasaulio mokslas išmokys redaguoti genetines patologijas indukuotose pluripotentose ląstelėse ir persodinti ląsteles žmonėse.

Toks požiūris dar nebuvo įgyvendintas, o jei įvyktų proveržis, tai, greičiausiai, bus brangus ir ilgas. Galų gale, praėjus keliems mėnesiams, tik nuo odos biopsijos, kol gaunamas iPSC, momentas Kiekviena ląstelių linija turi būti gaminama pagal standartines GMP sąlygas (Geros gamybos praktikos, geros gamybos praktikos), praeina mutacijų buvimo bandymai ir galimybė formuoti navikus.

Tačiau yra alternatyvus požiūris, kurio idėja priklauso S. Yamanake: santykinai visuotinių iPSC eilučių kūrimas. Problema ta, kad turime genų ir baltymų, kurie yra atsakingi už audinių suderinamumą (genai pagrindinis histologinio suderinamumo kompleksas), o jei jie nesutampa transplantacijos metu, atsiranda audinio atmetimo sindromas. Šie genai yra labai skirtingi, taigi, jei jums reikia transplantuoti organus (pvz., Kaulų čiulpus), sunku rasti donorą.Apytiksliai kalbant, kiekvienas žmogus pasaulyje gali tapti donoru tik vienam žmogui iš kiekvieno 40 tūkst. Suderinamumo tikimybė histologinio suderinamumo komplekso genų, net tarp brolių ir seserų, yra tik ketvirtadalis.

Kiekvienas iš mūsų turi dvi kopijas (alelis) geno: mes gavome vieną iš mūsų tėvo ir kitą iš savo motinos. Tačiau yra žmonių, kurių histocompatibiškumo kompleksinių genų kopijos yra vienodos (t. Y. Šių alelių atveju homozigotinis) yra laimingas sutapimas. Tokių donorų medžiaga yra tinkama transplantacijai (netgi organų, net iPSc) bet kuriam asmeniui, kuris turi bent vieną alelį. Manoma, kad trisdešimt iPSC eilučių iš sveikų homozigotinių ląstelių yra pakankamai, kad būtų užtikrintas 25-30% visų Japonijos gyventojų transplantacijos sutapimas, o penkiasdešimt – apie 75%. Žinoma, yra gana retų genų alelių, tačiau pusė šalies gyventojų jau yra labai geros.

"Yamanaka" renka tokį homozigotinį banką ir jau yra sukurtos kelios jose esančios ląstelių linijos. Japonams lengviau surinkti tokią bazę, nes jie turi didelių potencialių kaulų čiulpų donorų registrų su žinomais histocompatibiškumo komplekso variantais.

Rusijoje beveik nėra kaulų čiulpų donorystės skatinimo, todėl donorų bazė yra labai maža. Manau, kad jis turi būti išvystytas, nes tam reikia tik kraujo paaukoti (prieš tai švirkščiamas vaistas į veną, dėl kurio kaulų čiulpų ląstelės patenka į kraują). Tai yra įprasta praktika, pavyzdžiui, Vokietijoje. Manau, Rusija prie to atsivers.

Praėjo daugiau nei dešimt metų nuo somatinių ląstelių genetinės perprogramavimo iki daugybinės galios. Šiais metais žurnale New England Journal of Medicine Pirmosios transplantacijos ląstelių, gautų iš iPSC, rezultatai buvo išleisti pacientams, sergantiems tinklainės distrofija. Laikas parodys, ar ląstelės, gautos iš iPSC (neuronų, insulino gamybos ląstelių ir tt), pateks į plačią klinikinę praktiką. Pasak šio straipsnio autoriaus – turėtų.

Rusijoje kelios mokslinės grupės naudoja iPSC, kurdamos ligų modelius, įskaitant neurodegeneracinius, sukuria izogenines sistemas, naudojančias genomo redagavimo metodus. Gana daug darbo skiriama chromatino struktūros ir epigenetinės būklės pokyčiams perprogramuoti ir diferencijuoti.

Per pastaruosius metus, naudojant iPSC, buvo atlikta daug įdomių fundamentalių mokslinių darbų, skirtų pliuripotencyi palaikyti ir audinių diferenciacijai palaikyti. Ši sritis yra labai konkurencinga, bet gana brangi. Nepaisant to, iPSC pasirodė esąs patogus įrankis tiriant ligų molekulinius mechanizmus, organogenezę ir kitus procesus.

Literatūra
1. Bogomazova A. N., Vasina E. M., Kiselev SL, et al. Genetinių ląstelių perprogramavimas: nauja technologija pagrindiniams moksliniams tyrimams ir praktiniam naudojimui // Genetika. 2015. T. 51. No. 4. P. 466-478.
2. Illarioshkin S. N. Huntingtono liga kaip neurodegeneracinių ligų tyrimo modelis // Nacionalinės Parkinsono ligos ir judėjimo sutrikimų draugijos biuletenis. 2016. № 1. P. 3-11.
3. Maksimov V. V., Lagarkova M. A., Kiselev S. L. Gene ir ląstelių terapija akies tinklainės ligoms // Raktažodžių transplantacija ir audinių inžinerija. 2012. V. 7. Nr. 3. P. 12-20.
4. Nekrasov, E. D., Lebedeva, O. S., Vasina, E. M. ir kt. Huntingtono ligos tyrimo platforma, pagrįsta indukuotomis pluripotencinėmis kamieninėmis ląstelėmis // Eksperimentinė neurologija. 2012. V. 6. Nr. 4. S. 30-35.
5. Шевченко И.С., Захарова А.Г.Bandymų vamzdelių organai // Mokslas iš pirmų rankų. 2014. T. 55. Nr. 1. P. 19-23.


Like this post? Please share to your friends:
Parašykite komentarą

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: